◎资源环境学院植物病理学◎；普通植物病理
实习报告；姓名：学号：年级专业：指导老师：组别：小组成员：；实习日期：2013年6月；第1页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎；目录；前言；一.实习目的与要求以及内容二.实习安排三.实习过；四.植物病害病原鉴定报告五.病害调查报告六.实习；第2页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎；前言；植物病理学是主要研究引起◎资源环境学院植物病理学◎普通植物病理实习报告姓名：学号：年级专业：指导老师：组别：小组成员：实习日期：2013年6月第1页，共28页学◎资源环境学院植物病理学◎目录前言一.实习目的与要求以及内容二.实习安排三.实习过程四.植物病害病原鉴定报告五.病害调查报告六.实习实验总结七.外出展示九.实习建议十.结束语第2页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎前言植物病理学是主要研究引起农作物病害发生的各种生物与非生物引子及其致病机制、病原物与寄主间相互关系和控制病害发生、减轻发病程度、减少病害所致损失的原理及具体措施的一个重要农业学科。学习基本的植物病理学、流行学知识，掌握常见农业病害鉴别和病原物采集、分离等技能，是对作为高等农科院校植保专业学生提出的要求。为巩固和印证所学的植物病理知识，增强学生对本地区主要作物及主要植物病害的直观认识，我校资环学院为植保专业安排了植物病理学课的实习，以加强学生理论结合实际，提高分析问题和解决问题的能力。一.实习目的与要求及内容(一)实习目的通过两周的课程教学实习，巩固和印证所学植物病理学基础理论知识，将所学的理论知识用于分析生产实践问题，学会灵活运用课程知识解决生产实践问题，使对知识的理解掌握和运用更上一个台阶，通过实际操作和训练掌握课程实践教学大纲所规定的要掌握的专业基本操作技能；通过室内外观察，认识本地区主要作物及主要植物病害的形态特征；加强理论联系实际，提高分析问题和解决问题的能力。（二）实习要求纪律是完成课程教学实习任务的保障，在校内要严格遵守
学校的一切规章制度，在实习基地要遵守当地的各种规章制度和作息制度，生病或特殊情况不能参加实习的同学要提前像指导老师请假，在实习地点单独行动应先向带队老师报告，获准后才能出发。要培养集体主义精神，艰苦风斗精神，团结互助精神，不允许养成懒散的不良习气。实习期间要爱护农作物，病害调查和标本采集要尽量减少破坏性。（三）实习内容与方法1.线虫病害标本的采集、分离与鉴定；第3页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎2.植物病害症状观察，病害标本的采集和制作及常见病害鉴定；3.植物病原真菌玻片标本制作及病原真菌鉴定方法；4.植物病原的分离与培养。二.实习安排时间：2012年6月3日——2012年6月14日地点：华南农业大学6月3日华南农业大学跃进北植保农场采集病害标本及病害调查；6月5日佛山市高明区采集病害标本；6月7日广州市白云区采集病害标本；指导老师：刘琼光，纪春艳，温艳华，阮小蕾三.实习过程（一）实习行程1、6月23日：上午8:30全班同学在资环院楼实验室227进行实习动员，实习老师布置实习事宜以及注意事项，领取实习工具，到图书馆借用工具书，病理学实习正式拉开序幕；下午3点在跃进北植保农场集中采集植物病害标本与土壤。2、6月4日：上午8:30开始在资环院楼实验室228、229，刘琼光老师和纪春艳老师分别指导我们进行细菌和真菌的分离3、6月5日：上午8：15在东区芷园学生饭堂前集合，全体实习老师带领外出去广州市白云区采集病害标本。4、6月6日：下午3点在资环院楼实验室227，文艳华老师指导我们进行土壤中线虫的分离。5、6月7日：早上8:15在芷园饭堂前集合，全体实习老师和我们去佛山市高明区采集病害标本和进行田间病害调查。6、6月8日：上午8：30开始，全天在院楼228进行病害标本鉴定并观察第4页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎细菌分离培养结果；下午，在老师的指导下制作玻片标本。7、6月6日：早上8:30开始全天在资环院楼实验室227进行蜡叶标本的制作与病原鉴定，并观察真菌分离培养结果；下午进行拨片鉴定。8、6月10、11、12日休息三天9、6月13日：在资环院楼229进行病原玻片标本观察。10、6月14日：上午9：00进行普病实验考试；各组实习以ppt形式进行小组实习总结，下午在资环院楼进行实习交流总结。（二）实习过程中主要的内容1.外出采集病害标本和田间病害调查：（1）主要有三个病害标本采集地：华南农业大学跃进北植保农场、广州市白云区、佛山市高明区。（2）采集标本应准备的工具和材料有：塑料袋、标签、笔、记录本、小土铲、小剪刀、相机等。（3）注意取样部位：病害标本上有子实体的应该尽量在老叶上采集；病毒病应尽量采集顶梢与新叶；整个植株萎蔫的植株可连根挖出，可连通根际的土壤一起采集；危害根部的线虫病害标本要采集病根和根围土壤。（4）田间病害调查：选取田间的重要病害作为调查对象，采用五点取样法进行对此病害进行田间病害调查，每块田根据地形选择五个取样点，每点调查10株，根据不同作物的不同病害调查方法和严重度分级标准填写病害调查表和总结病害调查报告。（5）采集病害标本时，应记录采集时间、采集地点、采集者、寄主名称等信息；田间病害调查时，应记录调查时间、调查地点、调查病害、调查面积、调查人、气象资料、调查小组、调查结果等信息。（6）实习摄影：通过摄影将标本病害症状的自然状况和我们的实习过程记录下来。（7）标本的保存：将采集的标本夹在书本中干燥保存，用以标本病害鉴定。第5页，共28页 ◎资源环境学院植物病理学◎；普通植物病理实习报告；姓名：学号：年级专业：指导老师：组别：小组成员：；实习日期：2013年6月；第1页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎；目录；前言；一.实习目的与要求以及内容二.实习安排三.实习过；四.植物病害病原鉴定报告五.病害调查报告六.实习；第2页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎；前言；植物病理学是主要研究引起◎资源环境学院植物病理学◎普通植物病理实习报告姓名：学号：年级专业：指导老师：组别：小组成员：实习日期：2013年6月第1页，共28页学◎资源环境学院植物病理学◎目录前言一.实习目的与要求以及内容二.实习安排三.实习过程四.植物病害病原鉴定报告五.病害调查报告六.实习实验总结七.外出展示九.实习建议十.结束语第2页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎前言植物病理学是主要研究引起农作物病害发生的各种生物与非生物引子及其致病机制、病原物与寄主间相互关系和控制病害发生、减轻发病程度、减少病害所致损失的原理及具体措施的一个重要农业学科。学习基本的植物病理学、流行学知识，掌握常见农业病害鉴别和病原物采集、分离等技能，是对作为高等农科院校植保专业学生提出的要求。为巩固和印证所学的植物病理知识，增强学生对本地区主要作物及主要植物病害的直观认识，我校资环学院为植保专业安排了植物病理学课的实习，以加强学生理论结合实际，提高分析问题和解决问题的能力。一.实习目的与要求及内容(一)实习目的通过两周的课程教学实习，巩固和印证所学植物病理学基础理论知识，将所学的理论知识用于分析生产实践问题，学会灵活运用课程知识解决生产实践问题，使对知识的理解掌握和运用更上一个台阶，通过实际操作和训练掌握课程实践教学大纲所规定的要掌握的专业基本操作技能；通过室内外观察，认识本地区主要作物及主要植物病害的形态特征；加强理论联系实际，提高分析问题和解决问题的能力。（二）实习要求纪律是完成课程教学实习任务的保障，在校内要严格遵守学校的一切规章制度，在实习基地要遵守当地的各种规章制度和作息制度，生病或特殊情况不能参加实习的同学要提前像指导老师请假，在实习地点单独行动应先向带队老师报告，获准后才能出发。要培养集体主义精神，艰苦风斗精神，团结互助精神，不允许养成懒散的不良习气。实习期间要爱护农作物，病害调查和标本采集要尽量减少破坏性。（三）实习内容与方法1.线虫病害标本的采集、分离与鉴定；第3页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎2.植物病害症状观察，病害标本的采集和制作及常见病害鉴定；3.植物病原真菌玻片标本制作及病原真菌鉴定方法；4.植物病原的分离与培养。二.实习安排时间：2012年6月3日——2012年6月14日地点：华南农业大学6月3日华南农业大学跃进北植保农场采集病害标本及病害调查；6月5日佛山市高明区采集病害标本；6月7日广州市白云区采集病害标本；指导老师：刘琼光，纪春艳，温艳华，阮小蕾三.实习过程（一）实习行程1、6月23日：上午8:30全班同学在资环院楼实验室227进行实习动员，实习老师布置实习事宜以及注意事项，领取实习工具，到图书馆借用工具书，病理学实习正式拉开序幕；下午3点在跃进北植保农场集中采集植物病害标本与土壤。2、6月4日：上午8:30开始在资环院楼实验室228、229，刘琼光老师和纪春艳老师分别指导我们进行细菌和真菌的分离3、6月5日：上午8：15在东区芷园学生饭堂前集合，全体实习老师带领外出去广州市白云区采集病害标本。4、6月6日：下午3点在资环院楼实验室227，文艳华老师指导我们进行土壤中线虫的分离。5、6月7日：早上8:15在芷园饭堂前集合，全体实习老师和我们去佛山市高明区采集病害标本和进行田间病害调查。6、6月8日：上午8：30开始，全天在院楼228进行病害标本鉴定并观察第4页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎细菌分离培养结果；下午，在老师的指导下制作玻片标本。7、6月6日：早上8:30开始全天在资环院楼实验室227进行蜡叶标本的制作与病原鉴定，并观察真菌分离培养结果；下午进行拨片鉴定。8、6月10、11、12日休息三天9、6月13日：在资环院楼229进行病原玻片标本观察。10、6月14日：上午9：00进行普病实验考试；各组实习以ppt形式进行小组实习总结，下午在资环院楼进行实习交流总结。（二）实习过程中主要的内容1.外出采集病害标本和田间病害调查：（1）主要有三个病害标本采集地：华南农业大学跃进北植保农场、广州市白云区、佛山市高明区。（2）采集标本应准备的工具和材料有：塑料袋、标签、笔、记录本、小土铲、小剪刀、相机等。（3）注意取样部位：病害标本上有子实体的应该尽量在老叶上采集；病毒病应尽量采集顶梢与新叶；整个植株萎蔫的植株可连根挖出，可连通根际的土壤一起采集；危害根部的线虫病害标本要采集病根和根围土壤。（4）田间病害调查：选取田间的重要病害作为调查对象，采用五点取样法进行对此病害进行田间病害调查，每块田根据地形选择五个取样点，每点调查10株，根据不同作物的不同病害调查方法和严重度分级标准填写病害调查表和总结病害调查报告。（5）采集病害标本时，应记录采集时间、采集地点、采集者、寄主名称等信息；田间病害调查时，应记录调查时间、调查地点、调查病害、调查面积、调查人、气象资料、调查小组、调查结果等信息。（6）实习摄影：通过摄影将标本病害症状的自然状况和我们的实习过程记录下来。（7）标本的保存：将采集的标本夹在书本中干燥保存，用以标本病害鉴定。第5页，共28页 ◎资源环境学院植物病理学◎；2.实验室进行标本的整理及病原鉴定：；（1）将采集到的病害标本带到实验室，在老师的指导；（2）整理已鉴定标本，选取其中病症典型的叶片，继；（注：在标本鉴定过程中，要将在显微镜下观察到的病；3.植物病原细菌（柑橘溃疡病病原细菌）和真菌（水；细菌培养基：牛肉膏蛋白胨培养基；真菌培养基：马铃薯葡萄糖琼脂（pda）培养基（1；①消毒：提前◎资源环境学院植物病理学◎2.实验室进行标本的整理及病原鉴定：（1）将采集到的病害标本带到实验室，在老师的指导下，制作玻片，在显微镜下观察，参考工具书，鉴定出所采集的标本病害名称和学名，描述病原菌特征，并绘出病原形态图。（2）整理已鉴定标本，选取其中病症典型的叶片，继续用书本夹保持干燥以保存。（注：在标本鉴定过程中，要将在显微镜下观察到的病原形态和所对应的寄主形态用相机拍摄记录下来）3.植物病原细菌（柑橘溃疡病病原细菌）和真菌（水稻纹枯病菌）的分离与培养；细菌培养基：牛肉膏蛋白胨培养基真菌培养基：马铃薯葡萄糖琼脂（pda）培养基（1）植物病原细菌的分离（划线分离法）与培养步骤：①消毒：提前倒好牛肉膏蛋白胨培养基平板。并取3个小碟，分别加入一点95%的酒精点燃消毒。然后在其中依次分别加入半碟75%酒精、0.1%升汞、无菌水。选取一小片新鲜的柑橘溃疡病植株维管束病组织，用清水洗净；洗净后放于装有75%酒精的小碟中进行表面消毒30秒~1分钟；将病组织加入到0.1%升汞中消毒1分钟；将病组织加入到无菌水的小碟中漂洗3次。②捣碎：滴1~2ml无菌水在一个灭菌小皿中，将消毒好的病组织捣碎在所滴无菌水中，搅拌后静置10分钟，用以制备菌悬液。③划线：用接种环沾取一环菌悬液，用划线分离法在准备好的培养基中划线4次，每划完一次在酒精灯下灼烧一次。④培养：将划线的平板倒置，写好标签（注明姓名和日期），置于25—28℃培养箱中培养，3—5天后观察结果。要求及注意事项：a先倒平板，每2人一个小三角瓶，共倒4个皿，没人分离两个皿；b无菌操作，保持环境干净，减少人员流动；c分离时保持安静；d划线时动作要轻微，不要划破培养基。第6页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎成果展示：（2）植物病原真菌的分离与培养步骤：①pda培养基：在酒精灯火焰上方将pda培养基倒在无菌培养皿中，倒的过程中应避免污染。②消毒：并取3个小碟，分别加入少许95%的酒精点燃消毒。然后在其中依次分别加入半碟75%酒精、0.1%升汞、无菌水。切取十小片新鲜的真菌性病害植株组织（取病健部位），用清水洗净；洗净后放于装有75%酒精的小碟中进行表面消毒少于40秒钟；将病组织用镊子夹到0.1%升汞中消毒不超过40秒钟；将病组织加入到无菌水的小碟中漂洗3次。③放置：选取十小片病组织中较合格的五片，用镊子夹起并轻轻放在培养基上。④培养：将划线的平板倒置，写好标签（注明姓名和日期），置于25—28℃培养箱中培养，3—5天后观察结果。要求及注意事项：a无菌操作，防止培养基受污染b放置病组织于培养基时，第7页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎为防止平板倒置时病组织掉落，可轻轻用镊子按下病组织，使之固定，但动作要轻微，不能弄破培养基。成果展示：（没有分离出相应的真菌）原因分析：1.培养皿很干净:可能没有找到病原部位或者在制作过程中用了酒精灯加热；2.培养皿受污染：在制作过程中让实验室的菌物进入培养皿。4.植物病原线虫分离与观察（寄生性线虫与腐生性线虫区别观察）；(1)植物病原线虫的观察：①将小试管中收集到的物质倒入小皿中，在解剖镜下寻找线虫。②找到线虫后用胶头滴管将线虫吸到凹玻片中，盖上盖玻片，玻片在酒精灯上来回移动3~4次后，用显微镜寻找并观察、判断所分离出线虫。（有口针的线虫为寄生线虫，无口针的线虫为腐生线虫；有交合刺的线虫为雄虫，无交合刺的线虫为雌虫）第8页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎（2）成果展示这个实验还算成功，腐生型的、寄生型的都被我们找到了，而且，部分线虫可以很清晰地看到其内部结构。5.植物病害蜡叶标本的制作：（1）选取鉴定完成的病害病症典型的叶片，至少两片。（2）将选取的叶片置于吸水纸中，用熨斗加压烘干叶片至叶片完全干燥。（3）将熨干的病害叶片固定在一张a4白纸上（最好展示叶片的正反面），在白纸的右下角写上采集时间、病害名称、拉丁学名、采集时间、采集地点、采集人。第9页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎成果展示6.植物病原真菌的玻片的制作（主要掌握半永久性玻片的制作）：（1）玻片标本分类（按保存时间长短、浮载剂的不同而分类）临时玻片保存时间：半天浮载剂：水半永久玻片保存时间：3—10年浮载剂：棉蓝乳酚油封固剂：中性树胶第10页，共28页 ◎资源环境学院植物病理学◎；永久玻片；保存时间：永久浮载剂（封固剂）：中性树胶、加拿大；挑刮法（实验要求）、撕表皮法、粘贴法、盖玻片培养；老师指导我们的实习要求是学习用挑刮法制作豇豆煤霉；（pseudocercosporacruenta；graminis）的半永久玻片；ⅰ.挑刮法制作豇豆煤霉病（pseudocerco；步骤：在载玻片上滴一滴浮载剂，用刀片沾取◎资源环境学院植物病理学◎永久玻片保存时间：永久浮载剂（封固剂）：中性树胶、加拿大树胶（2）制作方法：挑刮法（实验要求）、撕表皮法、粘贴法、盖玻片培养菌制作法、涂抹法、组织整体透明法、徒手切片法（实验要求）、冰冻切片法、石蜡切片法等等。（3）玻片制作：老师指导我们的实习要求是学习用挑刮法制作豇豆煤霉病（pseudocercosporacruenta）和徒手切片法制作竹子黑痣病菌（phallychoragraminis）的半永久玻片。ⅰ.挑刮法制作豇豆煤霉病（pseudocercosporacruenta）的半永久玻片：步骤：在载玻片上滴一滴浮载剂，用刀片沾取浮载剂后刮下豇豆叶表面上生长良好的粉状物，并将其点在已滴有浮载剂的载玻片上，盖上盖玻片；在显微镜下观察到煤霉菌的分生孢子梗上着生着串生的椭圆形或卵形分生孢子；完成后写上标签。注意：a不能两种菌混杂；b浮载剂不能太大滴；c盖玻片要用手帕擦干净。ⅱ.徒手切片法制作竹子黑痣病菌（phallychoragraminis）的半永久玻片：步骤：选取小黑粒较多且明显突出的病组织，将病组织切成长1cm,宽0.5cm的长方形（横切或纵切皆可）；在载玻片上连续快速切片；切完后滴上适量清水，在解剖镜下挑取至少3个能够观察到子囊壳中子囊的薄片；再挑到滴有棉蓝乳酚油的玻片上，然后封盖。注意：a切片时刀片和载玻片保持垂直；b切片要尽量切薄。四、植物病害病原鉴定报告姓名：张静娴学号：201130200325专业：植物保护（农产品
安全与检测）班级：植保安检一班组别：第四组◎资源环境学院植物病理学◎第12页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎第13页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎第14页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎ ◎资源环境学院植物病理学◎；第16页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎；第17页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎；第18页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎；第19页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎；第20页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎第16页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎第17页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎第18页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎第19页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎第20页，共28页 ◎资源环境学院植物病理学◎；丝就会无影无踪；腊叶标本制作可以说是最轻松的了，我们可以选出最完；在实习过程中，我们第四小组七个人互相帮助，齐心协；植病实习就这样结束了，虽然短暂，但是受益匪浅，值；第26页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎；七、外出展示；第27页，共28页；◎资源环境学院植物病理学◎；八、实习存在的问题和建议；1、希望能增加做实验或实习的时◎资源环境学院植物病理学◎丝就会无影无踪。最后切了不知道多少片之后终于选出了三根有子囊的细丝，这个时候依然不可以掉以轻心，以为你盖玻片的时候也有可能把那无比纤细的小叶子弄断，然后就要重新切······这个实验让我受益匪浅。我一直是一个浮躁没有耐心也不细心的人，所以我重做了很多遍。做实验时需要专心，耐心，细心的，这样才能高效率而且有收获。腊叶标本制作可以说是最轻松的了，我们可以选出最完整的叶子，偏出好看的形状做出漂亮的图案，女孩子最喜欢啦~培养基的制作也很有意思，不过由于操作不当，我们组几乎全军覆没，大家都污染严重，实验失败。虽然失败了，但是大家一起讨论了实验失败的原因，反思了自己的操作过程，总结了经验，所以我们依然收获很大。在实习过程中，我们第四小组七个人互相帮助，齐心协力，让我感到了团结力量大的真谛。每个人各有所长，充分发挥每个人的长处能够达到事半功倍的效果。在实习过程中，我们组的关系也越来越好，增进了大家的感情，毕竟平时上课的时候完全没有实习时候这样朝夕相处的时候。这也是实习给我的最大的收获之一。植病实习就这样结束了，虽然短暂，但是受益匪浅，值得回忆。很多东西，只有真正做过之后，才发现其中的艰难，所以更应该尊重他人的劳动成果，珍惜他人的劳动成果。在实习过程中我学习到了很多知识，发现了很多不足。实习带给我的感悟和感动，将是我一辈子的财富。很感谢学校给我们创造的实习的机会，让我们不仅学到了很多书本上没有的实践知识和经验，也让我们学到了团队精神，感恩，友谊等许多受益一生的东西。第26页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎七、外出展示第27页，共28页◎资源环境学院植物病理学◎八、实习存在的问题和建议1、希望能增加做实验或实习的时间。植物病理学是一门理论与实践联系很强的学科，离开田间搞研究只不过是纸上谈兵。毕竟实践和理论是存在巨大差异的，很多东西只能在实践中才能学习到。在平时的实验中，我希望能够多增加一些自己动手操作的实验，而不是总看永久玻片，实习的时候制作临时玻片都要弄好久。2、本次实习工具设备不齐全。比如说需要无菌操作的地方没用提供无菌操作台，又我知道，在经费，时间等等的限制之下，我们不能做到真正搞科研时的实验条件。但是，我们既然实习，既然有这个实验，就要做到最好。若实验本身就漏洞百出，岂不是与培养学生具有严谨的科研态度、治学精神的初衷相违吗？而且当我们真正到了有设备的地方，很多东西依然不会操作。那么实习就没有学到实际的实验技能。3、完善实验指导。在发给我们的实习指导上面，没有具体的操作步骤，老师讲过ppt之后也是直接关掉，具体操作的时候很容易记不住然后出差错。希望老师可以完善实习指导，那我们在做实验之前可以预习，在做实验可以有一个指导，试验完之后可以看着反思自己哪一步做的不够好。4、要求增加实习经费。增加实习经费，增加外出时间和次数，能够看到更多种类的植物病害，才到更多的样本，学到更多的知识。九、结束语通过这次实习，我学到了很多课堂上学不到的东西，我们认识了很多植物病害，采集了很多标本，对于不能肯定的植物病害，我们小组成员查阅了很多资料，并在玻璃皿中培养了许多未知病原物，然后分离出病原物，做成玻片在显微镜下观察病菌形态，然后判断是属于那个门哪个科，感觉受益匪浅，让我们把理论知识真正的运用到了生产实践中，于田间地头学习到了更丰富的知识。同时，也加深了我们对课堂知识的理解与记忆，使我们学会了病害调查的常用方法及病害病情指数和发病率的计算方法，增强了动手能力，提高了综合素质第28页，共28页